产品分类 更多>>
产品简称：MOVAS-1
中文名称：小鼠主动脉平滑肌细胞
细胞数量：1*10^6
组织来源：成年C57BL/6小鼠，心，主动脉，平滑肌
形态特征：纺锤形
生长方式：贴壁生长
背景描述：1999年12月用胶原酶-弹性蛋白酶消化法分离的原代血管平滑肌细胞，用SV40大T抗原和新霉素耐药基因的逆转录病毒进行了转染。在0.4mg/mlG418存在下选择克隆并通过限制稀释进行亚克隆。
培养条件：DMEM高糖，10%胎牛血清，丙酮酸钠；空气95%，二氧化碳5%；37℃培养
换液频：率2-3天
传代比例：1:5-1:8
冻存液配方：95%完全培养基，5%DMSO
安全性：BSL-1
供应限制：仅供科研
运输方式：常温运输（T25培养瓶）
细胞培养方法:
1、小鼠主动脉平滑肌细胞规格细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
